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      遂寧分子生物學(xué)實驗室設(shè)計

      admin 2020-11-27 05:41:24 閱讀

      分子生物學(xué)實驗室設(shè)計分子生物學(xué)實驗室設(shè)計

      分子生物學(xué)實驗室主要應(yīng)用于大專院校教學(xué),科研機構(gòu)和醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)的相關(guān)科學(xué)研究。


      在進行植物組織培養(yǎng)工作之前,首先應(yīng)對工作中需要哪些最基本的設(shè)備條件有個全面的了解,以便因地制宜地利用現(xiàn)有房屋,或新建、改建實驗室。實驗室的大小取決于工作的目的和規(guī)模。以工廠化生產(chǎn)為目的,實驗室規(guī)模太小,則會限制生產(chǎn),影響效率。

      在設(shè)計實驗室時,應(yīng)按組織培養(yǎng)程序來沒計,避免某些環(huán)節(jié)倒排,引起日后工作混亂。植物組織培養(yǎng)是在嚴格無菌的條件下進行的。要做到無菌的條件,需要一定的設(shè)備、器材和用具,同時還需要人工控制溫度、光照、濕度等培養(yǎng)條件。

      實驗室設(shè)計原則:保證無菌操作,達到工作方便,防止污染。

      實驗室組成:化學(xué)實驗室、洗滌菌室、無菌操作室(接種室)、培養(yǎng)室、細胞學(xué)實驗室、其他小型儀器設(shè)備。
      1) 化學(xué)實驗室(準(zhǔn)備室):完成所使用的各種藥品的貯備、稱量、溶解、配制、培養(yǎng)基分裝等。
      主要設(shè)備:藥品柜、防塵櫥(放置培養(yǎng)容器)、冰箱、天平、蒸餾水器、酸度計及常用的培養(yǎng)基配制用玻璃儀器.
      2) 洗滌、滅菌室:完成各種器具的洗滌、干燥、保存、培養(yǎng)基的滅菌等。
      主要設(shè)備:水池、操作臺、高壓滅菌鍋、干燥滅菌器(如烘箱)等。
      3) 無菌操作室(接種室):主要用于植物材料的消毒、接種、培養(yǎng)物的轉(zhuǎn)移、試管苗的繼代、原生質(zhì)體的制備以及一切需要進行無菌操作的技術(shù)程序。
      主要設(shè)備:紫外光源、超凈工作臺、消毒器、酒精燈、接種器械(接種鑷子、剪刀、解剖刀、接種針)等。
      接種室宜小不宜大,一般7~8平米,要求地面、天花板及四壁盡可能密閉光滑,易于清潔和消毒。配置拉動門,以減少開關(guān)門時的空氣擾動。接種室要求干爽安靜,清潔明亮。在適當(dāng)位置吊裝1~2盞紫外線滅菌燈,用以照射滅菌。最好安裝一小型空調(diào),使室溫可控,這樣可使門窗緊閉,減少與外界空氣對流。接種室應(yīng)設(shè)有緩沖問,面積1m2為宜。進入無菌操作室前在此更衣?lián)Q鞋,以減少進出時帶入接種室雜菌。緩沖間最好也安一盞紫外線滅菌燈,用以照射滅菌。
      4) 培養(yǎng)室:培養(yǎng)室是將接種的材料進行培養(yǎng)生長的場所。培養(yǎng)室的大小可根據(jù)需要培養(yǎng)架的大小、數(shù)目、及其他附屬設(shè)備而定。其設(shè)計以充分利用空間和節(jié)省能源為原則。

      分子生物學(xué)實驗室PCR
      PCR實驗室并沒有嚴格的凈化要求,但是為避免各個實驗區(qū)域間交叉污染的可能性,宜采用全送全排的氣流組織形式。同時,要嚴格控制送、排風(fēng)的比例以保證各實驗區(qū)的壓力要求。
      1.試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū):該實驗區(qū)主要進行的操作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應(yīng)混合液的制備。試劑和用于標(biāo)本制作的材料應(yīng)直接運送至該區(qū),不得經(jīng)過其他區(qū)域。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內(nèi),并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的貯存試劑。 對與氣流壓力的控制,本區(qū)并沒有嚴格的要求。
      2.標(biāo)本制備區(qū):該區(qū)域主要進行的操作為臨床標(biāo)本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增反應(yīng)管和測定RNA時cDNA的合成。 本區(qū)的壓力梯度要求為:相對于鄰近區(qū)域為正壓,以避免從鄰近區(qū)進入本區(qū)的氣溶膠污染。另外,由于在加樣操作中可能會發(fā)生氣溶膠所致的污染,所以應(yīng)避免在本區(qū)內(nèi)不必要的走動。
      3. 擴增反應(yīng)混合物配制和擴增區(qū):該區(qū)域主要進行的操作為DNA或cDNA擴增。此外,已制備的DNA模板和合成的cDNA(來自樣本制備區(qū))的加入和主反應(yīng)混合液(來自試劑貯存和制備區(qū))制備成反應(yīng)混合液等也可在本區(qū)內(nèi)進行。在巢式PCR測定中,通常在第一輪擴增后必須打開反應(yīng)管,因此巢式擴增有較高的污染危險性,第二次加樣必須在本區(qū)內(nèi)進行。 本區(qū)的壓力梯度要求為:相對于鄰近區(qū)域為負壓,以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。為避免氣溶膠所致的污染,應(yīng)盡量減少在本區(qū)內(nèi)的不必要的走動。個別操作如加樣等應(yīng)在超凈臺內(nèi)進行。
      4.擴增產(chǎn)物分析區(qū):該區(qū)域主要進行的操作為擴增片段的測定。如使用全自動封閉分析儀器檢測,此區(qū)域可不設(shè)。 本區(qū)是最主要的擴增產(chǎn)物污染來源,因此對本區(qū)的壓力梯度的要求為:相對于鄰近區(qū)域為負壓,以避免擴增產(chǎn)物從本區(qū)擴散至其它區(qū)域。
      5.完備的實驗室配套設(shè)施:完備的實驗室配套設(shè)施是保證實驗工作的必要條件,應(yīng)根據(jù)各個實驗室實驗內(nèi)容的不同配備相應(yīng)的設(shè)備和儀器,如超凈工作臺、生物安全柜、離心機、加樣器等。

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