層流手術潔凈室靜態(tài)（動態(tài)）空氣采樣方法及特殊結構:莢膜、鞭毛、菌毛濃度和靜壓差日常監(jiān)測
層流手術潔凈室的環(huán)境和落菌日常檢測只有動態(tài)和靜態(tài)空氣采樣兩種方式，下面介紹層流手術室(無塵室)靜態(tài)空氣采樣檢測法。
1、層流手術室(無塵室)靜態(tài)空氣采樣方法：
（1）在無塵室當送風口集中布置時，應對手術區(qū)和周邊區(qū)進行分別檢測；當送風口分散布置時，按全無塵室統(tǒng)一布點方法檢測。
（2）落菌沉降法采樣時，用直徑9cm的培養(yǎng)皿，在空氣中暴露30分鐘，37℃培養(yǎng)24h，培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)（cfu）代表空氣中沉降下來的細菌數(shù)，以個/皿表示。
（3）落菌浮游法采樣時，用裂隙采樣器在空氣中隨機采樣30分鐘，對采樣皿或采樣條培養(yǎng)得出的菌落數(shù)（cfu），代表空氣中浮游下來的細菌數(shù)，以個/m3表示。
2、落菌（fungus)采樣高度：
（1）采樣點可布置在地面上或不高于地面0.8m的任意高度上；
（2）在手術區(qū)檢測時應無手術臺；當手術臺已固定時，檢測高度應在臺面之上0.25cm。
3、布點方法：（見下圖）
4、落菌采樣注意事項：
（1）在100級無塵區(qū)域檢測時，采樣口應對著氣流流動方向；在其他區(qū)域檢測時，采樣口均向上；
（2）采樣后的培養(yǎng)基條或培養(yǎng)皿，應37℃條件下培養(yǎng)24h，并計算菌落數(shù)，菌落數(shù)的平均值（The average value)均四舍五入選位到小數(shù)點后1位；
（3）每次落菌（fungus)采樣時間不應小于30分鐘。
（4）不論用何種方法檢測細菌濃度，都必須有兩次空白對照。第一次用于檢測培養(yǎng)皿或培養(yǎng)基條（每批一個對照皿（條））；第2次對操作過程做對照試驗（每室或每區(qū)將1個對照皿（條），打開后又立即封蓋，進行模擬(定義:對真實事物或者過程的虛擬)操作）；兩次對照結果必須為陰性，整個操作過程應符合無菌操作的要求。
（5）特別提示在:新房驗收時，應最后做空氣、物表特殊結構:莢膜、鞭毛、菌毛檢測。
潔凈手術室靜態(tài)（空態(tài)）空氣采樣方法（沉降法）對照表
5、層流手術室環(huán)境細菌濃度和靜壓差日常監(jiān)測（Food Monitor)：
根據(jù)最新GMP標準，層流手術室的設計建造標準越來越高，因此對層流手術室的日常環(huán)境管理和檢測要每天都進行，保障術前術后的有效正常運行。下面介紹手術室的日常監(jiān)測方法：
6、層流手術室空氣日常監(jiān)測（Food Monitor)方法：
要求日常實行動態(tài)監(jiān)測（Food Monitor)，必測項目為平板采樣法（落菌沉降法）或采樣器法(浮游菌法)檢測細菌菌落總數(shù)。
（1）回風口動態(tài)平板采樣法：應在手術開始、手術2小時、手術結束前抽檢3-4次。每個回風口中部擺放3個傾斜30℃，Φ90培養(yǎng)皿，暴露30分鐘后，37OC培養(yǎng)24小時。
標準：每皿菌落計數(shù)平均值應符合表4標準要求。單皿最大值不應超過平均值3倍。
（2）動態(tài)采樣器法：浮游菌菌落檢測應在手術進行如切皮、縫合、連臺手術之間、手術進行4小時等，選擇不少于3個程序，測定細菌菌落總數(shù)。
標準：I級<30cfu/m3；II級<150 cfu/m3；III級<450 cfu/m3；IV級<500 cfu/m3。靜壓差因為潔凈室的環(huán)境是一個密閉的潔凈環(huán)境，門關閉時室內(nèi)的氣壓大于室外的氣壓，從而保證潔凈室內(nèi)的潔凈空氣只能向室外流動，室外的空氣不會進入室內(nèi)，開門后就破壞了壓差系統(tǒng)，潔凈間的凈化質(zhì)量也將受到影響。
（3）其他潔凈用房在當天上午10時和下午4時各測1次，在每個回風口中部擺放3個Φ90培養(yǎng)皿，沉降0.5h后在37℃下培養(yǎng)24h。
標準：同回風口動態(tài)平板采樣法標準。
（4）采樣次數(shù)：按出臺的潔凈手術部醫(yī)院管理控制標準執(zhí)行。
7、表面染菌（fungus)密度監(jiān)測方法：
（1）采樣時間：消毒后10分鐘之內(nèi)（各類潔凈用房，作為靜態(tài)實測數(shù)據(jù)）、各手術室手術結束后和各類潔凈用房的上午10時。
（2）采樣地點：有代表性地點，每個房間每種表面不少于2點（如手術臺、桌、燈等）。
（3）采樣及檢測方法：按照《醫(yī)院消毒衛(wèi)生標準》（GB15982-1955）。
（4）標準：同回風口動態(tài)平板采樣法標準。
8、醫(yī)護人員手采樣：每次抽檢人數(shù)不少于3人
9、靜壓差監(jiān)測（Food Monitor)方法：pa（帕）
（1）方法：儀器測定法。
（2）儀器：液柱式微壓計，最小刻度（Scale)2Pa。
（3）人員：一人持測定膠管并復核，一人操作儀器（appliance）。
A、關門：應把潔凈區(qū)域內(nèi)所有的門關閉，最好有人守護。
B、測定：從手術室最里面潔凈級別最高的房間依次向外測定，凡是可相通的相鄰兩室都要測定，一直測到可與室外相通的房間。應有一人在待測房間手持伸入該房間的膠管，使管口處于0.8m高度，管口端面垂直于地面，避開氣流方向和渦流(又稱:傅科電流) 區(qū)。
C、檢查：如果靜壓太小，不易判斷正負，可用線頭之類放在門縫外觀察。凈化車間檢測 濕度45－65%；GMP粉劑車間濕度在50%左右為宜；電子車間濕度略高以免產(chǎn)生靜電。噪聲≤65dB（A）；新風補充量是總送風量的10%－30%；照度300LX。
D、調(diào)節(jié)：如發(fā)現(xiàn)測出的壓差未達到要求，可調(diào)節(jié)風口或閥門(作用:控制部件)開關重測。
（5）監(jiān)測標準 ：I、II級> 8pa；III、IV級> 5 pa；潔凈區(qū)對非潔凈區(qū)>10 pa。
（6）測定次數(shù)：根據(jù)需要隨時檢測并留有記錄。
10、相對濕度監(jiān)測（Food Monitor)：
夏季：不得連續(xù)2天>60%，不得發(fā)生2次以上。靜壓差由于層流流量計適用于層流流動狀態(tài)，從流體力學的角度分析是適用于低雷諾數(shù)下的流動。流 體在流動過程中粘性力占主導地位。 由于粘性力的影響，流體在流動過 程中將造成壓力能的損耗，使壓力 下降。在穩(wěn)定流動過程中，流體的壓力損失與流體粘度及流量之間存在固定的關系。
冬季：不得連續(xù)（Continuity)2天<30%。不得發(fā)生2次以上。
綜上所述：一般層流手術室對環(huán)境要求較高，因此必須對層流手術室的特殊結構:莢膜、鞭毛、菌毛濃度、靜壓差等指標（target aim)性的常規(guī)項目進行日常監(jiān)測，以保證層流手術潔凈室能正常安全有效運行。