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      云南GMP無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室的運(yùn)行及管理

      admin 2020-04-30 05:49:01 閱讀


      GMP無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室的運(yùn)行及管理

        一、室內(nèi)環(huán)境管理(guǎn lǐ)
      無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室設(shè)有無(wú)菌操作間、緩沖間和更衣間,無(wú)菌操作間潔凈度達(dá)到10000級(jí),超凈臺(tái)潔凈度達(dá)到100級(jí)且室內(nèi)溫度應(yīng)保持在20~24℃,濕度保持在45%~60%[1],此設(shè)置不僅滿足人體舒適度且又不利于室內(nèi)微生物的生存。PCR實(shí)驗(yàn)室結(jié)構(gòu)和設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于對(duì)健康成年人已知無(wú)致病作用的微生物,如用于教學(xué)的普通微生物實(shí)驗(yàn)室等。初效、中效過(guò)濾器需要6個(gè)月更換1次,高效過(guò)濾器需要每年更換1次,以保證室內(nèi)潔凈度達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)。紫外燈達(dá)到使用壽命(lifetime)會(huì)影響消毒滅菌的效果,應(yīng)定期巡查更換,同時(shí)應(yīng)加強(qiáng)其他指標(biāo)的監(jiān)測(cè),如潔凈度、細(xì)菌菌落數(shù)、靜壓差和風(fēng)量等。

        二、物流管理
      經(jīng)過(guò)γ射線滅菌的細(xì)胞培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、移液管、離心管等用1000mg/L濃度的消毒液徹底擦拭器材表面,消毒后放置于傳遞窗中,紫外燈照射30min后方可帶入實(shí)驗(yàn)室。PCR實(shí)驗(yàn)室國(guó)家實(shí)驗(yàn)室代表國(guó)家最高水平,是按國(guó)際一流標(biāo)準(zhǔn)建立的,規(guī)模非常大,基本包括本學(xué)科領(lǐng)域所有研究方向,而且人員配備上要求面向國(guó)內(nèi)外招聘最優(yōu)秀的研究人員,直接參與國(guó)際競(jìng)爭(zhēng),往往是多學(xué)科交叉的創(chuàng)新平臺(tái)。高壓消毒的器材如止血鉗、治療盤、離心套管等要用包布包裹2層,經(jīng)高壓蒸汽滅菌和烤箱烘干后使用。使用前應(yīng)檢查物品包裹內(nèi)外各種監(jiān)測(cè)指示劑是否符合要求,再?zèng)Q定使用。貯存器材可放入無(wú)菌室的柜櫥內(nèi),若超過(guò)有效期應(yīng)重新滅菌。進(jìn)包裝間要嚴(yán)格洗手,穿工作衣、戴口罩、帽子,包裝前檢查包布、治療巾,應(yīng)清潔干燥無(wú)破損,做到一用一洗一消毒,各類器材應(yīng)光潔無(wú)銹、性能完好齊全。
      外用3M化學(xué)指示膠帶封貼并注明品名、包裝者、查對(duì)者、滅菌期及有效使用期,各類滅菌包包扎應(yīng)松緊適度、整齊,減少各種感染的機(jī)會(huì)。所有實(shí)驗(yàn)室器材需在最外層傳遞窗中用紫外燈照射30min后方可帶入緩沖間。滅菌包需在緩沖間內(nèi)剝?nèi)プ钔鈱影己蠓娇蓭霟o(wú)菌操作間。在無(wú)菌操作間內(nèi)剝?nèi)?nèi)層包布后擺放到固定(fixed)位置備用。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)各種器材要排放有序,定期檢查,補(bǔ)充基數(shù)。為保證潔凈度,應(yīng)嚴(yán)禁堆放雜物,以防污染。污敷料及垃圾廢液等應(yīng)分別放入專用廢液缸和污物桶中,待操作完畢后移出實(shí)驗(yàn)室。徹底清潔室內(nèi)物品及地面,減少污物在室內(nèi)的停留時(shí)間。

        對(duì)已污染或疑似污染培養(yǎng)基、細(xì)胞因子等應(yīng)立即丟棄。動(dòng)物(SPF級(jí))實(shí)驗(yàn)室每類生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室根據(jù)所處理的微生物及其毒素的危害程度各分為四級(jí)。各級(jí)實(shí)驗(yàn)室的生物安全防護(hù)要求依次為:一級(jí)最低,四級(jí)最高。實(shí)驗(yàn)室設(shè)定了單獨(dú)的陽(yáng)性工作區(qū)域,包括陽(yáng)性無(wú)菌(意思:沒(méi)有活菌)操作間、緩沖間和更衣間。陽(yáng)性工作區(qū)域與陰性工作區(qū)域完全隔離,防止肝炎病毒通過(guò)血液及相關(guān)物品等感染陰性患者回輸?shù)募?xì)胞,防止患者通過(guò)細(xì)胞回輸感染乙肝病毒。工作人員進(jìn)入陽(yáng)性區(qū)域后,不得再進(jìn)入陰性區(qū)域,陽(yáng)性間每次使用的洗手衣需加入1000mg/L濃度消毒液,洗滌晾干以備下次使用,每次進(jìn)入陽(yáng)性間所著一次性隔離衣在用后應(yīng)棄于陽(yáng)性間垃圾袋中,陽(yáng)性液體污物應(yīng)瓶裝密封后放入陽(yáng)性間醫(yī)療垃圾袋中。陽(yáng)性醫(yī)療垃圾袋從陽(yáng)性間的傳遞窗中傳出,放入專用醫(yī)療垃圾桶中,由院內(nèi)專人負(fù)責(zé)回收。


        三、運(yùn)行制度管理
      工作人員于每次實(shí)驗(yàn)操作前30min打開(kāi)實(shí)驗(yàn)室空氣凈化系統(tǒng)和紫外燈。如果實(shí)驗(yàn)室長(zhǎng)期不用,需要在實(shí)驗(yàn)前3h打開(kāi)空氣凈化系統(tǒng),以提高空氣潔凈度。在潮濕季節(jié)使用時(shí),打開(kāi)紫外燈時(shí)間需適當(dāng)延長(zhǎng),以加強(qiáng)消毒效果,保證實(shí)驗(yàn)質(zhì)量。進(jìn)入無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室的人員要嚴(yán)格著裝,穿著經(jīng)嚴(yán)格高壓蒸汽滅菌過(guò)的洗手衣、隔離衣、口罩、帽子及用10g/L過(guò)氧乙酸溶液浸泡后晾干的拖鞋。著裝程序如下:進(jìn)入第一更衣間后脫掉外衣?lián)Q一更拖鞋;隨即進(jìn)入第二更衣間,穿戴經(jīng)高壓蒸汽滅菌的一次性口罩帽子,著洗手衣?lián)Q二更拖鞋,帶無(wú)菌橡膠手套;進(jìn)入第三更衣間后著隔離服,換三更拖鞋,之后方可進(jìn)入無(wú)菌操作間操作。
      保持實(shí)驗(yàn)室相對(duì)密閉狀態(tài),嚴(yán)格控制人員進(jìn)出,必要情況下需要工作人員互相溝通協(xié)調(diào)時(shí),可通過(guò)房間對(duì)講電話聯(lián)絡(luò),將工作人員出入次數(shù)降到最低,減少不必要的渦流形成,使室內(nèi)的氣壓始終處于正壓狀態(tài)。各項(xiàng)操作要集中,操作過(guò)程要輕穩(wěn),不能在實(shí)驗(yàn)室抖動(dòng)衣物布類,以防止微粒在室間飛揚(yáng),保證室間空氣的潔凈。實(shí)驗(yàn)室人員進(jìn)入無(wú)菌(fungus)操作間應(yīng)衣帽整潔、修剪指甲,嚴(yán)格執(zhí)行無(wú)菌技術(shù)操作。一切操作必須在百級(jí)凈化的超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行,超凈工作臺(tái)在使用前需打開(kāi)其紫外燈輻照滅菌30min以上,并同時(shí)打開(kāi)超凈工作臺(tái)進(jìn)行吹風(fēng)。實(shí)驗(yàn)中應(yīng)保持無(wú)菌操作,拿取物品不要跨過(guò)無(wú)菌面;培養(yǎng)瓶不要過(guò)早打開(kāi),對(duì)于已開(kāi)瓶口者要盡量避免垂直放置;吸管等不能觸及瓶口,以防細(xì)菌污染或細(xì)胞的交叉感染。每次操作過(guò)程中留取定量樣品進(jìn)行細(xì)菌、真菌、支原體檢測(cè)(檢查并測(cè)試),以檢查無(wú)菌操作的可靠性及細(xì)胞是否污染。操作完畢后應(yīng)及時(shí)清理無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室。組織實(shí)驗(yàn)室全體人員進(jìn)行理論學(xué)習(xí),明確無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室工作原理、環(huán)境要求,設(shè)置嚴(yán)格的工作流程,明確分工并強(qiáng)化責(zé)任技師有效的合作配合意識(shí)。

        四、衛(wèi)生清潔管理
      清潔工作應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室空氣凈化系統(tǒng)(system)運(yùn)行中進(jìn)行,清潔工具采用不掉纖維的織物材料制作。一切清潔工作必須采用濕式打掃,每周進(jìn)行1次徹底清潔。需用1000mg/L含氯消毒液擦拭房間桌、椅、墻壁、天花板以及轉(zhuǎn)凳、顯微鏡等固定在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的物體。用體積分?jǐn)?shù)為75%的酒精擦拭培養(yǎng)箱、超凈臺(tái)和紫外線燈管。地板很容易藏塵(如人體皮膚、毛發(fā)的脫落、布類的纖維等)、藏菌等,是室內(nèi)的污染源,應(yīng)在吸塵器吸除后用1000mg/L含氯消毒液擦拭。抽風(fēng)、回風(fēng)口也易藏塵、藏菌,應(yīng)重點(diǎn)(zhòng diǎn)拆洗清潔,以確保塵埃過(guò)濾效果。衛(wèi)生清潔時(shí)應(yīng)用10g/L過(guò)氧乙酸溶液浸泡消毒工作人員所穿的拖鞋,待晾干后再使用。每周進(jìn)行徹底清潔時(shí)應(yīng)將實(shí)驗(yàn)室內(nèi)物品如移液器、移液器槍頭、止血鉗、治療盤(蕁蕁上接第76頁(yè)蕁蕁)以及離心機(jī)套管等進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。清潔工作完成后,手術(shù)室凈化系統(tǒng)繼續(xù)運(yùn)行時(shí)間一般不應(yīng)少于30min。
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